本研究利用固相萃取法作為樣品的前處理方法，HPLC法作為檢測手段。該方法可簡化樣品的前處理過程，節(jié)省有機(jī)溶劑的使用，操作簡便。

二、實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)物

依諾沙星(CAS:74011-58-8)，恩諾沙星(CAS:93106-60-6)，培氟沙星(CAS:70458-95-6)， 丹諾沙星(CAS:119478-55-6)

三、應(yīng)用范圍

本方法適用于食品中喹諾酮的HPLC檢測及確證。

四、參考標(biāo)準(zhǔn)

《GB/T 21312-2007動物源性食品中14種喹諾酮藥物殘留檢測方法》

五、實(shí)驗(yàn)材料

NuAnalyticalPolyCleanX-HLB固相萃取柱200mg/6mL。

六、實(shí)驗(yàn)方法

1、 樣品待測溶液制備

稱取均質(zhì)牛奶試樣5.0 g試樣(精確至0.001g)于50 mL離心管中，加入20 mLEDTA-Mellvaine緩沖溶液，1000r/min渦旋混合1min，超聲提取10min，10000r/min離心5 min(溫度低于5 ℃)，提取三次合并上清液。

2、活化

依次用6 mL甲醇和6 mL水活化。

3、上樣和洗脫

將提取液以2 mL/min的速度過柱，棄去濾液，用2 mL5%甲醇水溶液淋洗，棄去淋洗

液，將小柱抽干，再用6 mL甲醇洗脫并收集洗脫液。

4、重新溶解

50℃緩慢氮?dú)饬鳁l件下吹至近干，用1 mL 0.2 %甲酸水溶液溶解。1000 r/min渦旋混合1 min，經(jīng)0.45 μm有機(jī)濾膜過濾，供HPLC測定。

5、HPLC條件

色譜柱：SuperLu C18 (250×4.6mm，5μm)

檢測器：UV@254 nm

流動相：A: 乙腈   B:0.1%甲酸的水溶液

柱溫：室溫         

流速：1.0mL/min           

進(jìn)樣量：20μL