手性柱正反相模式的切換方法需要謹(jǐn)慎操作，以確保色譜柱的性能和分離效果不受影響。以下是一個(gè)通用的切換步驟，但請(qǐng)注意，不同品牌和型號(hào)的手性柱可能有特定的切換要求，因此在實(shí)際操作中應(yīng)參考色譜柱的說明書。

### 一、切換前的準(zhǔn)備

1. **了解色譜柱特性**：
   - 確認(rèn)色譜柱是否支持正反相模式的切換。
   - 了解色譜柱的耐受范圍，包括pH值、溶劑類型等。

2. **準(zhǔn)備所需溶劑**：
   - 準(zhǔn)備異丙醇或其他過渡溶劑。
   - 準(zhǔn)備正相和反相流動(dòng)相所需的溶劑。

3. **沖洗色譜系統(tǒng)**：
   - 在切換之前，使用當(dāng)前流動(dòng)相沖洗色譜系統(tǒng)，包括色譜柱、進(jìn)樣器、檢測(cè)器等部分，以確保系統(tǒng)清潔。

### 二、切換步驟

1. **降低系統(tǒng)壓力**：
   - 在切換過程中，應(yīng)盡量避免系統(tǒng)壓力突然升高，以免損壞色譜柱。

2. **使用過渡溶劑**：
   - 將當(dāng)前流動(dòng)相逐漸替換為異丙醇或其他過渡溶劑。這一步是為了減少流動(dòng)相切換時(shí)對(duì)手性固定相的沖擊。
   - 過渡溶劑的流速應(yīng)適當(dāng)降低，以延長沖洗時(shí)間，確保充分過渡。

3. **切換流動(dòng)相**：
   - 當(dāng)過渡溶劑完全替代當(dāng)前流動(dòng)相后，可以開始切換為正相或反相流動(dòng)相。
   - 切換時(shí)，應(yīng)逐漸調(diào)整流動(dòng)相的比例，避免突然改變。

4. **平衡色譜柱**：
   - 在新的流動(dòng)相下，讓色譜柱運(yùn)行一段時(shí)間以進(jìn)行平衡。平衡時(shí)間取決于色譜柱的類型和所需的分離效果。

5. **調(diào)整儀器參數(shù)**：
   - 根據(jù)新的流動(dòng)相和分離需求，調(diào)整儀器的參數(shù)，如流速、檢測(cè)波長等。

### 三、切換后的注意事項(xiàng)

1. **監(jiān)測(cè)色譜柱性能**：
   - 切換后，應(yīng)密切監(jiān)測(cè)色譜柱的性能，包括分離度、峰形等。
   - 如發(fā)現(xiàn)性能下降或異常，應(yīng)及時(shí)查找原因并采取相應(yīng)措施。

2. **避免頻繁切換**：
   - 頻繁切換正反相模式可能會(huì)對(duì)色譜柱造成損害。因此，在實(shí)際應(yīng)用中，應(yīng)盡量避免不必要的切換。

3. **記錄切換過程**：
   - 記錄切換過程中的關(guān)鍵步驟和參數(shù)，以便在出現(xiàn)問題時(shí)能夠追溯原因。

### 四、特定品牌手性柱的切換要求

- 對(duì)于某些特定品牌的手性柱（如大賽璐、菲羅門等），可能需要遵循特定的切換步驟和要求。例如，大賽璐手性柱在正相和反相流動(dòng)相之間進(jìn)行切換時(shí)需要用異丙醇小流速的過渡，且壓力不能超過100bar。菲羅門Chiral N與M系列的正相與SFC用手性柱在正相和SFC分離模式之間切換時(shí)也必須用異丙醇過渡。

綜上所述，手性柱正反相模式的切換需要謹(jǐn)慎操作，并遵循特定的步驟和要求。在實(shí)際應(yīng)用中，應(yīng)參考色譜柱的說明書并密切監(jiān)測(cè)色譜柱的性能。